Kinovate社 高性能ポリマービーズ『NittoPhase HL』

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NittoPhase HLは日東電工(株)のグループ会社であるKinovate Life Sciences 社が製造及び販売を行う核酸合成用ポリスチレンビーズ担体です。高いローディング量と担体の膨潤性により、高収量で核酸を合成することが可能です。また粒径など担体のパラメーターを均一化しており、合成効率・再現性の向上が期待されます。バルクスケールでの供給にも対応しており、核酸医薬の製造においても使用されています。リンカー種やローディング量を幅広く取り揃えており、カスタムリンカーにも対応しています。お気軽にお問い合わせください。

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特長

  • 高収量・高品質
  • 中量~商業スケールの核酸合成に最適
  • リンカー種・ローディング量を幅広くラインアップ
  • カスタムリンカーにも対応
  • 核酸医薬の商用生産への採用実績あり

リンカーラインアップ

リンカー種​:
UnyLinker / DNA / RNA (2’-O-TBDMS, 2’-OMe)​​
これらの他、カスタムリンカーにも対応しています。​
ローディング量​:
150 ~ 400 µmol/gM まで幅広くラインアップ​​

各種担体はグラム~キログラムスケールの供給に対応しています。​
核酸医薬の商用生産への採用実績もあり、初期検討~製造段階までサポートが可能です。

アプリケーション

・核酸合成能の比較

アンチセンスオリゴヌクレオチド (18mer) を合成ターゲットとし、純度>95%となるよう精製を行った後の収量を測定することにより、各固相担体の核酸合成能を比較しました。

グラフ
OD(k)/μmol after purification (>95%)
Synthesis conditions​
Synthesis scale
: 1mmol​
Loading
: UnyLinker 350 μmol/g​
Purification
: Ion exchange chromatography​
Analytical conditions​
Column
: RP (C18)​
Detection Wavelength
: 260 nm​
Mobile Phase A
: 100mM HFIP, 7mM TEA solution​
Mobile Phase B
: Acetonitrile​

ラボ~商業スケールでの合成例

ラボスケール

NittoPhase HL
Loading
Sequence Synthesis Scale
(µmol)
Crude Yield
(OD260/µmol)
Purity
(%)
T200 RNA 21mer 165 106 79
T250* RNA 21mer 176 99 84
T350 DNA 20mer 283 128 83
T400 DNA 20mer 307 135 83
UnyLinker350 DNA 20mer 290 134 83

Table 1. Results of lab scale DNA & RNA oligo synthesis with NittoPhase HL Solid Support.

Figure 1. IP-HPLC Trace for NittoPhase HL T250 RNA synthesis.

中スケール

NittoPhase HL
Loading
Sequence Synthesis Scale
(mmol)
Crude Yield
(OD260/µmol)
Purity
(%)
Modified250** RNA 21mer 2 S 145 79
AS 142 84
UnyLinker330*‡ DNA 16mer 2 105 83
UnyLinker350‡ DNA 20mer 2 101 80
UnyLinker400‡ DNA 20mer 2 94 73

**In collaboration with Quark Pharmaceuticals, Inc.
‡Data Courtesy of Isis Pharmaceuticals, Inc.
S = Sense strand, AS = Antisense strand

Table 2. Results of mid-scale DNA & highly modified RNA oligo synthesis with NittoPhase HL Solid Support.

Figure 2. IP-HPLC Trace for NittoPhase HL UnyLinker 330 DNA synthesis.

臨床スケール

NittoPhase HL
Loading
Sequence Synthesis Scale
(mmol)
Crude Yield
(OD260/µmol)
Purity
(%)
Modified250*** RNA 21mer 65 S 151 76
AS 136 79
UnyLinker315‡ DNA 20mer 550 111 86
UnyLinker315‡ DNA 20mer 700 112 90
UnyLinker315*‡ DNA 20mer 900 105 83

***In collaboration with NITTO DENKO Avecia Inc. & Quark Pharmaceuticals, Inc.
‡ Data Courtesy of Isis Pharmaceuticals, Inc.
S = Sense strand, AS = Antisense strand

Table 3. Results of clinical-scale DNA & highly modified RNA oligosynthesis with NittoPhase HL Solid Support.

Figure 3. IP-HPLC Trace for NittoPhase HL UnyLinker DNA synthesis.

DNA/RNAの合成例

DNA合成

Sequence Synthesis Scale
(mmol)
Support Type Loading
(μmol/g)
Crude Purity
(%)
Crude Yield
(OD260/µmol)
5-10-5 MOE gapmer 1 Support A 360 78.5 93
78.6 93
5-10-5 MOE gapmer 1 NittoPhase HL 431 68.8 80
5-10-5 MOE gapmer 2 NittoPhaseHL 350 80.4 101
75.2 94
5-10-5 MOE gapmer 2 NittoPhaseHL 0.4 71.4 90
72.8 93
3-10-3 MOE gapmer 2 Support A 360 82.8 100
83.1 100
3-10-3 MOE gapmer 2 NittoPhaseHL 324 82.8 101
83 105
5-10-5 MOE gapmer 220 Support A 316 81 108
5-10-5 MOE gapmer 220 Supprt A 325 79.6 100
5-10-5 MOE gapmer 220 NittoPhaseHL 319 83.2 108
5-10-5 MOE gapmer 550 NittoPhaseHL 319 86.3 111
5-10-5 MOE gapmer 700 NittoPhaseHL 315 90.7 112
5-10-5 MOE gapmer 900 NittoPhaseHL 315 83.2 105

* Data Courtesy of Isis Pharmaceuticals, Inc.

Figure 4. IP-HPLC-UV Trace for NittoPhase HL UnyLinker DNA synthesis.

RNA合成

Sequence Synthesis
Scale
Support Type Loading
(μmol/g)
Weight Yield
(mg/μmol)
Crude Purity
(%)
Crude yield
(OD260/µmol)
5-5-5-5-1-mer 200 μmol Support A 308 5.06 71.2 141
5-5-5-5-1-mer 175 μmol NittoPhaseHL 251 6.22 75.4 175
3-5-5-6-2-mer 303 μmol NittoPhaseHL 244 8.76 74.0 124
6-5-5-3-2-mer 567 μmol NittoPhaseHL 207 9.49 84.8 112
4-2-7-6-2-mer 1 mmol NittoPhaseHL 253 7.27 62.4 87
4-2-7-6-2-mer 4 mmol NittoPhaseHL 253 8.56 77.4 120
Figure 5. IP-HPLC-UV Trace for NittoPhase HL T250 RNA synthesis.

高修飾RNA合成

Support Type Loadin
(μmol/g)
Synthesis
Scale
Strand Crude Purity
(%)
Crude yield
(OD260/µmol)
Support C 30 65 μmol Sense 61 122
Antisense 58 78
NittoPhaseHL 250 325 μmol Sense 74 128
Antisense 68 81
NittoPhaseHL 250 2 mmol Sense 79 145
Antisense 84 142
NittoPhaseHL 250 16.4 mmol** Sense 73 149
Antisense 78 157
NittoPhaseHL 250 65 mmol** Sense 76 151
Antisense 79 136

**In collaboration with NITTO DENKO Avecia Inc. & Quark Pharmaceuticals, Inc.

担体特性

NittoPhase HL NittoPhase
材質 ポリスチレン ポリスチレン
性状 多孔質・膨潤性 多孔質・膨潤性
担体官能基 -OH -OH
粒子径 (中央値) 85 µm 90 µm
細孔径 (中央値) 45 nm 50 nm
乾燥体積 2.7 mL/g 3.2 mL/g
膨潤体積 4.0 mL/g (アセトニトリル)
6.1 mL/g (トルエン)
3.7 mL/g (アセトニトリル)
5.8 mL/g (トルエン)
推奨カラム充填量 (6.3 mL カラム) DNA: 0.80 g (20-mer, 350 µmol/g)
RNA: 0.69 g (21-mer, 250 µmol/g)
DNA: 1.10 g (20-mer, 200 µmol/g)
RNA: 1.05 g (21-mer, 150 µmol/g)

製品一覧

UnyLinker Supports

UnyLinker Supports の構造
UnyLinker の切断機構

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担体 リンカー ローディング量
(µmol/g)
メーカーコード
NittoPhase UnyLinker 50 10-00-03-050
80 10-00-03-080
100 10-00-03-100
200 10-00-03-200
NittoPhase HL UnyLinker 150 20-00-03-150
200 20-00-03-200
250 20-00-03-250
300 20-00-03-300
350 20-00-03-350
400 20-00-03-400

※Kinovate社は、Ionis Pharmaceuticals社からライセンスを受けUnyLinker™製品を提供しています。

DNA Supports

A(Bz)

U

G(iBu)

C(Ac)

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担体 Base ローディング量
(µmol/g)
メーカーコード
NittoPhase HL A(Bz) 200 21-12-00-200
250 21-12-00-250
300 21-12-00-300
350 21-12-00-350
NittoPhase HL T 200 21-30-00-200
250 21-30-00-250
300 21-30-00-300
350 21-30-00-350
NittoPhase HL G(iBu) 200 21-43-00-200
250 21-43-00-250
300 21-43-00-300
350 21-43-00-350
NittoPhase HL C(Ac) 200 21-21-00-200
250 21-21-00-250
300 21-21-00-300
350 21-21-00-350

RNA (2’-O-TBDMS) Supports

A(Bz)

U

G(iBu)

C(Ac)

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担体 Base ローディング量
(µmol/g)
メーカーコード
NittoPhase HL A(Bz) 150 22-12-00-150
200 22-12-00-200
250 22-12-00-250
NittoPhase HL U 150 22-50-00-150
200 22-50-00-200
250 22-50-00-250
NittoPhase HL G(iBu) 150 22-43-00-150
200 22-43-00-200
250 22-43-00-250
NittoPhase HL C(Ac) 150 22-21-00-150
200 22-21-00-200
250 22-21-00-250

2’-OMe RNA Supports

A(Bz)

U

G(iBu)

C(Ac)

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担体 塩基 ローディング量
(µmol/g)
メーカーコード
NittoPhase HL A(Bz) 200 24-12-00-200
250 24-12-00-250
300 24-12-00-300
350 24-12-00-350
NittoPhase HL U 200 24-50-00-200
250 24-50-00-250
300 24-50-00-300
350 24-50-00-350
NittoPhase HL G(iBu) 200 24-43-00-200
250 24-43-00-250
300 24-43-00-300
350 24-43-00-350
NittoPhase HL C(Ac) 200 24-21-00-200
250 24-21-00-250
300 24-21-00-300
350 24-21-00-350
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  • 掲載されている製品について
    【試薬】
    試験・研究の目的のみに使用されるものであり、「医薬品」、「食品」、「家庭用品」などとしては使用できません。
    試験研究用以外にご使用された場合、いかなる保証も致しかねます。試験研究用以外の用途や原料にご使用希望の場合、弊社営業部門にお問合せください。
    【医薬品原料】
    製造専用医薬品及び医薬品添加物などを医薬品等の製造原料として製造業者向けに販売しています。製造専用医薬品(製品名に製造専用の表示があるもの)のご購入には、確認書が必要です。
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