プロインスリン ELISAキット

プロインスリンはインスリンおよびC-ペプチドの前駆体です。膵島β細胞内でアミノ酸86個 (分子量約9,400 Da) の1本鎖として合成された後、分泌顆粒に移行し、その過程でS-S結合が形成され、さらに酵素分解によりインスリンとC-ペプチドとなります。このとき分泌顆粒には、分解されずに残ったプロインスリンも少量存在し、顆粒が分泌される際に共に血中に放出されます。プロインスリンの生理活性はインスリンの5-10%であると言われています。プロインスリンはインスリンおよびC-ペプチドのアミノ酸配列を包含しているため、血中のインスリンやC-ペプチドを測定しようとすると、プロインスリンも測定してしまいます。そこで血中のインスリンを免疫学的測定法で定量した際には、プロインスリンも含まれていることを考慮してIRI (Immuno-reactive Insulin) と呼び、インスリンそのものとは区別しています。なお、プロインスリンのインスリンに対する割合は、インスリン生合成過程の状況を反映していると考えられています。

II型糖尿病患者では空腹時とグルコース負荷時いずれの状態においても、血中プロインスリンレベルは健常者に比べて高く、インスリンに対するプロインスリンの割合も増加します。またプロインスリンからインスリンへの転換酵素に異常が生じたり、転換酵素の作用を受けない変異型のプロインスリンが産生されると家族性高プロインスリン血症となり、分泌顆粒中のIRIの大半をプロインスリンが占めるようになります。さらに甲状腺機能亢進では、甲状腺ホルモン過多によって、糖新生による血糖上昇がインスリン産生放出を促進し、分解されずに残ったプロインスリンも多く放出されます。

プロインスリンの概説は「なるほど!! ELISA インスリン測定」にも掲載されております。

レビス™ マウス/ラットプロインスリン ELISAキットはマウスおよびラットのプロインスリンを定量的に測定するためのELISAキットです。インスリンやC-ペプチドと交差性が低く、プロインスリンを特異的に測定することが可能です。

キット性能

検量線範囲	0.156-10 pmol/L
測定対象	プロインスリン
測定対象検体	マウス 血清/血漿 ラット 血清/血漿
必要検体量	10 μL
測定時間	約5時間
検出法	発色系 (主波長: 450 nm/副波長: 620 nm)

検量線例

類似ペプチドとの交差性

動物種	分子	交差性 (%)
マウス	プロインスリン	100
	インスリン	検出感度未満
	C-ペプチド	検出感度未満
	レプチン	検出感度未満
ラット	プロインスリン	100
	インスリン	検出感度未満
	C-ペプチド	検出感度未満
	レプチン	検出感度未満
ヒト	プロインスリン	交差性あり
	インスリン	検出感度未満
	C-ペプチド	検出感度未満

※ 交差性は、1,060 pmol/mL時のデータ

マウス血清での測定例 (糖負荷時の経時変化)

マウス: BALB/c、メス、8W、5匹
糖負荷: トレーランG50、0.5 mg/g体重、経口投与
採血: 血清 (pre / 糖負荷後 15分・30分・120分)
絶食: 12時間 (pre)

ラット血清での測定例

ラット	条件	検体数	平均値	標準偏差
GK、16W、オス	-	N=8	3.13 pmol/L	1.47 pmol/L
CD(SD)、12W、メス	不断給餌	N=3	3.27 pmol/L	1.97 pmol/L

2重測定