スフェロイド・細胞用透明化試薬

SCALEVIEW-S4

データ提供元:国立研究開発法人理化学研究所
脳神経科学研究センター細胞機能探索技術研究チーム / 光量子工学研究センター生命光学技術研究チーム
濱裕先生、星田哲志先生、宮脇敦史先生
協力:エビデント株式会社

SCALEVIEW-S4は、透明化手法あるScaleS法に使用するSCALEVIEW-Sシリーズのひとつです。

SCALEVIEW-S4に浸漬するだけで、スフェロイドやオルガノイドを透明化することができます。

ad_20210120_tissue_clearing_reagents_catalog.png

SCALEVIEW-S4 特長

  • スフェロイドやオルガノイドの透明化が可能
  • 透明化にかかる時間は約1日 4)
  • 抗体染色/蛍光色素染色が可能

透明化可能組織

スフェロイド、オルガノイド、ニューロスフェア

透明化に必要なもの

★スフェロイド培養にはスリットウェルプレートが便利です。

試薬
  1. SCALEVIEW-S4
  2. deScale Solution (製品コード:041-34425)
  3. パラホルムアルデヒド (製品コード:160-16061)
器具
  1. 観察用プレート (底面がカバーガラスのものを推奨)
  2. SCALEVIEW-S4 透明化標本向け蛍光顕微鏡と推奨対物レンズ※※
  • スフェロイドはSCALEVIEW-S4中では浮遊しやすくなっているため、SCALEVIEW-S0とSCALEVIEW-A2を併せての使用を推奨しています (下記プロトコル参照)
  • ※屈折率 (RI=1.49) に合った対物レンズをご用意ください。データ取得前にお手持ちの顕微鏡メーカーに確認することを推奨いたします。

SCALEVIEW-S4プロトコル

スフェロイドの簡易透明化プロトコル

スフェロイドの簡易透明化プロトコル
操作手順イメージ 4)
操作手順イメージ

*透明化後、1.5% (wt/vol) アガロースを用いて包埋し、不動化することで観察が容易になります。

スフェロイドの免疫組織染色プロトコル (AbScale法)

スフェロイドの免疫組織染色プロトコル (AbSca<i>l</i>e法)

アプリケーション

T47D細胞スフェロイド観察例

Data by Molly E, Boutin, et al. : Scientific Reports, 8, 11135 (2018).

図1. T47D細胞 スフェロイドのSCALEVIEW-S4 による透明化画像例
核はHoechstを用いて染色。共焦点顕微鏡を用いてZスタックで、スフェロイド画像を取得。

図2. T47D細胞 スフェロイドのノコダゾール処理後、ヒストンH3抗体を用いた測定例
SCALEVIEW-S4 による透明化処理により、薬剤投与下のスフェロイド表面と内部への影響を観察することが可能。

ニューロスフェア3次元免疫染色

図3. AbScale法を用いたニューロスフェアの3次元染色
アダルトラットの海馬から調整した神経幹細胞のニューロスフェアの3次元染色。

F-POD®透明化アプリケーション

サンプル RLUN14:上皮内腺がん、細気管支肺胞上皮がん

サンプル RLUN20

抗体
色素

顕微鏡
対物レンズ
ZO-1-Alexa488 conjugate
Actistain670 (ファロイジン)
DAPI
:FV3000
:UPLSAPO30×S

データ提供元:福島県立医科大学 高木 基樹先生、協力:エビデント株式会社

F-PDO®(がん組織由来培養細胞)を用いた抗がん剤等の薬効評価解析の受託も承っています。
詳細は、こちらをご確認ください。

iCell® Hepatocytes2.0透明化

詳しいプロトコルはこちら

参考文献

  1. Hama,H.et al. : Nature Neuroscience, 14, 1481(2011).
  2. Hama,H.et al. : Nature Neuroscience, 18, 1518(2015).
  3. Hama H, et al. : Protocol Exchange (2016), doi:10.1038/protex.2016.019
  4. Molly E, Boutin, et al. : Scientific Reports, 8, 11135 (2018).
  5. Takahashi N, et al. : Cells, 8, 481 (2019).

製品一覧

  • 項目をすべて開く
  • 項目をすべて閉じる

関連製品一覧

  • 項目をすべて開く
  • 項目をすべて閉じる

SCALEVIEWは、エビデント株式会社の登録商標です。
SCALEVIEWの名称は、富士フイルム和光純薬株式会社がエビデント株式会社より使用許諾を受けている登録商標です。

  • 掲載内容は本記事掲載時点の情報です。仕様変更などにより製品内容と実際のイメージが異なる場合があります。
  • 掲載されている製品について
    【試薬】
    試験・研究の目的のみに使用されるものであり、「医薬品」、「食品」、「家庭用品」などとしては使用できません。
    試験研究用以外にご使用された場合、いかなる保証も致しかねます。試験研究用以外の用途や原料にご使用希望の場合、弊社営業部門にお問合せください。
    【医薬品原料】
    製造専用医薬品及び医薬品添加物などを医薬品等の製造原料として製造業者向けに販売しています。製造専用医薬品(製品名に製造専用の表示があるもの)のご購入には、確認書が必要です。
  • 表示している希望納入価格は「本体価格のみ」で消費税等は含まれておりません。
  • 表示している希望納入価格は本記事掲載時点の価格です。