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永年のペプチド合成と精製、分析技術を駆使した高品質のペプチドを製造販売

ペプチド研究所　酵素基質

ペプチド研究所

生理作用を持つペプチドは、前駆体となるタンパクから酵素により切り出され産生されます。また、それらペプチドを分解するのも酵素です。
ペプチド研究所は、酵素研究を実施される皆様を、『酵素基質』でサポートする製品をラインアップしています。

酵素基質

酵素研究においては、通常、発色団や蛍光団をつけて分析しやすくした基質を用いて実験を行います。特に、酵素による切断前には無色もしくは無蛍光であった化合物が、酵素による切断を受けて発色もしくは蛍光を発するようになる基質は、酵素研究における強力なツールです [1]。そのような基質の利用は、クロマトグラフィーなどで分離することなく、系全体の吸光度もしくは蛍光測定による酵素反応の追跡を可能とします。現在までに、様々なタイプの酵素基質が知られており、なかでも、よく用いられる基質を以下に紹介いたします。

パラニトロアニリン誘導体（発色試薬) pNAなど

パラニトロアニリド (pNA) を含む基質はほとんど無色です。一方、酵素により切り出されるパラニトロアニリンは黄色です。この変化を紫外吸光計にて検出する事が可能です [2]。同様な化合物としてパラニトロアニリンにカルボン酸を付加し、水溶性を高めた誘導体も知られています [3]｡

Glu(pNA) [4] / パラニトロアニリン

【検出波長】

ペプチド-pNA ： UV 405 nm

製品一覧

※製品情報は、表中の 品名 をクリックしてください。
※価格情報は、表中の メーカーコード をクリックしてください。

メーカーコード 品名 CAS No. 標的酵素
3125 Boc-Leu-Ser-Thr-Arg-pNA 115710-89-9 Activated Protein C
3068 Ala-pNA 1668-13-9 Aminopeptidase
3014 Leu-pNA 4178-93-2
3074-v Gly-Pro-pNA·Tos [GPNT] 65096-46-0 X-Prolyl Dipeptidyl-Aminopeptidase
3015 Bz-Tyr-pNA 6154-45-6 Chymotrypsin
3071 Suc-Ala-Ala-Ala-pNA [STANA] 52299-14-6 Elastase
3118 Suc-Ala-Pro-Ala-pNA 72682-79-2
3228-v Pyr-Pro-Val-pNA 83329-36-6 Human Granulocyte Elastase
3129 Glt-Ala-Ala-Pro-Leu-pNA 118231-05-3 Pancreatic Elastase
3066 Glu(pNA) 122864-94-2 γ-Glutamyl Transpeptidase
3111 Z-Gly-Gly-Leu-pNA 53046-98-3 Neutral Endopeptidase
3162-v Suc-Ala-Leu-Pro-Phe-pNA 128802-78-8 PPIase (Peptidyl Prolyl cis-trans Isomerase)
3127 Z-Ala-Ala-Leu-pNA 61043-33-2 Subtilisin A and Serine Protease of Bacillus subtilis IFO3027, Neprilysin
3130 Pyr-Phe-Leu-pNA 85901-57-1 Thiol Protease
3013 Bz-DL-Arg-pNA·HCl [DL-BAPA] 911-77-3 Trypsin-like Protease
3057 Bz-L-Arg-pNA·HCl [L-BAPA] 21653-40-7 Trypsin-like Protease / Papain
3117 Suc-Ala-Ala-pNA 61043-66-1 -
3067 Glu-pNA 24032-35-7 -

クマリン誘導体 (蛍光試薬) MCA、AFCなど

アミド結合によりメチルクマリンアミド (MCA) を含有する酵素基質は蛍光を発しません。一方、酵素反応により放出されるアミノメチルクマリン (AMC) は、強い蛍光をもちます [5]。この変化を蛍光光度計などで検出します。同様な化合物として、アミノトリフルオロメチルクマリン (AFC) などが知られています [6]。

Arg-MCA [7]

【検出波長】

ペプチド-MCA(AMC)： ex. 380 nm / em. 460 nm
ペプチド-AFC： ex. 400 nm / em. 505 nm など

製品一覧

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メーカーコード 品名 CAS No. 標的酵素
3112-v Boc-Leu-Ser-Thr-Arg-MCA 73554-93-5 Activated Protein C
3147-v Ala-MCA 77471-41-1 Aminopeptidase
3091-v Leu-MCA 66447-31-2
3132-v Lys-MCA 92605-76-0
3149-v Met-MCA 94367-34-7
3148-v Phe-MCA 98516-72-4
3156-v Z-Val-Lys-Met-MCA 141223-71-4 Amyloid A4-generating enzyme and Proteasome
3222-v Suc-D-Asp-MCA 676465-82-0 D-Aspartyl Endopeptidase
3243-v Phe-Met-MCA 2922195-04-6 Bacterial Dipeptidyl Peptidase-7
3122-v Boc-Gln-Arg-Arg-MCA 109376-05-8 Carboxyl Side of Paired Basic Residue Cleaving Enzyme
3142-v Boc-Gly-Arg-Arg-MCA 113866-14-1
3143-v Boc-Gly-Lys-Arg-MCA 109358-48-7
3140-v Boc-Leu-Arg-Arg-MCA 109358-46-5
3141-v Boc-Leu-Lys-Arg-MCA 109358-47-6
3161-v Ac-Tyr-Val-Ala-Asp-MCA 149231-65-2 Caspase-1
3186-v Ac-Trp-Glu-His-Asp-MCA 189275-74-9 Caspase-1/14
3203-v Ac-Val-Asp-Val-Ala-Asp-MCA 194022-52-1 Caspase-2
3220-v Ac-Asp-Asn-Leu-Asp-MCA 958001-92-8 Caspase-3
3171-v Ac-Asp-Glu-Val-Asp-MCA 169332-61-0 Caspase-3/7/8
3181-v Ac-Val-Glu-Ile-Asp-MCA 219137-97-0 Caspase-6
3195-v Ac-Ile-Glu-Thr-Asp-MCA 348079-17-4 Caspase-8/6 and Granzyme B
3198-v Ac-Leu-Glu-His-Asp-MCA 292633-16-0 Caspase-9
3123-v Z-Arg-Arg-MCA 88937-61-5 Cathepsin B
3113-v Arg-MCA 65286-27-3 Cathepsin H
3208-v Z-Gly-Pro-Arg-MCA 201928-42-9 Cathepsin K
3210-v Z-Leu-Arg-MCA 156192-32-4 Cathepsin K/S/V
3211-v Z-Val-Val-Arg-MCA 124485-41-2 Cathepsin S/L
3154-v Glt-Ala-Ala-Phe-MCA 144398-31-2 Chymotrypsin
3114-v Suc-Ala-Ala-Pro-Phe-MCA 88467-45-2
3120-v Suc-Leu-Leu-Val-Tyr-MCA 94367-21-2 Chymotrypsin, Ingensin/Proteasome and Calpain
3108-v Suc-Gly-Pro-Leu-Gly-Pro-MCA 72698-36-3 Collagenase-like Peptidase
3206-v Ubiquitin-MCA - Deubiquitinating Enzyme
3124-v Lys-Ala-MCA 94149-28-7 Dipeptidyl-Aminopeptidase II
3133-v Suc-Ala-Ala-Ala-MCA 73617-90-0 Elastase
3100-v Suc-Ala-Pro-Ala-MCA 88467-44-1
3106-v Boc-Leu-Thr-Arg-MCA 73554-92-4 Factor VIIa-Tf
3094-v Boc-Ile-Glu-Gly-Arg-MCA 65147-06-0 Factor Xa
3138-v Z-Pyr-Gly-Arg-MCA 113865-89-7
3134-v Boc-Glu(OBzl)-Ala-Arg-MCA 113866-16-3 Factor XIa
3136-v Boc-Gln-Gly-Arg-MCA 113865-85-3 Factor XIIa
3155-v Boc-Arg-Val-Arg-Arg-MCA 139979-73-0 Furin
3159-v Pyr-Arg-Thr-Lys-Arg-MCA 155575-02-3
3185-v Ac-Lys-Thr-Lys-Gln-Leu-Arg-MCA 756486-60-9 Hepatocyte Growth Factor-Activator (HGF-A)
3102-v Boc-Leu-Gly-Arg-MCA 65147-09-3 Horseshoe Crab Clotting Enzyme
3153-v Suc(OMe)-Ala-Ala-Pro-Val-MCA 72252-90-5 Human Leukocyte/Porcine Pancreatic Elastase
3176-v Z-Leu-Arg-Gly-Gly-MCA 167698-68-2 Isopeptidase T
3252-v Z-Arg-Leu-Arg-Gly-Gly-MCA 167698-69-3 Isopeptidase T and SARS-CoV/SARS-CoV-2 Papain-like Protease (PLpro)
3209-v Z-Ala-Ala-Asn-MCA 149697-16-5 Legumain
3215-v Z-His-Glu-Lys-MCA 327182-05-8 Lys-Gingipain
3096-v Pro-Phe-Arg-MCA 115918-56-4 Pancreatic/Urinary Kallikrein, and Proteasome
3095-v Z-Phe-Arg-MCA 65147-22-0 Plasma Kallikrein, Cathepsin B/L, and Arg-Gingipain
3105-v Boc-Glu-Lys-Lys-MCA 73554-85-5 Plasmin
3104-v Boc-Val-Leu-Lys-MCA 73554-84-4 Plasmin and Calpain
3236-v Met-Leu-MCA 1009549-31-8 Porphyromonas Gingivalis Dipeptidyl-Peptidase 7
3235-v Leu-Asp-MCA 929621-97-6 Porphyromonas Gingivalis Dipeptidyl-Peptidase 11
3109-v Suc-Gly-Pro-MCA 80049-85-0 Prolyl Endopeptidase (Post-Proline Cleaving Enzyme)
3090-v Gly-Pro-MCA 67341-42-8 X-Prolyl Dipeptidyl-Aminopeptidase
3179-v Z-Leu-Leu-Glu-MCA 348086-66-8 Proteasome
3177-v Z-Leu-Leu-Leu-MCA 152015-61-7
3144-v Boc-Ala-Gly-Pro-Arg-MCA 118850-78-5 Rat ANP Precursor Processing Enzyme
3110-v Suc-Arg-Pro-Phe-His-Leu-Leu-Val-Tyr-MCA 76524-84-0 Renin and Proteinase A
3250-v Ac-Abu-Tle-Leu-Gln-MCA - SARS-CoV/SARS-CoV-2 Main Protease (Mpro)
3251-v Ac-Thz-Tle-Leu-Gln-MCA 2762689-43-8
3248-v Z-Gly-Gly-Arg-MCA 66216-78-2 Thrombin
3139-v Boc-Asp(OBzl)-Pro-Arg-MCA 113866-00-5 α-Thrombin
3093-v Boc-Val-Pro-Arg-MCA 65147-04-8
3145-v Pyr-Gly-Arg-MCA 72194-66-2 t-PA and u-PA (Urokinase)
3201-v Ala-Ala-Phe-MCA 62037-41-6 Tripeptidyl Peptidase II
3092-v Bz-Arg-MCA 83701-04-6 Trypsin
3135-v Boc-Gln-Ala-Arg-MCA 113866-20-9
3107-v Boc-Phe-Ser-Arg-MCA 73554-90-2 Trypsin, Tryptase, 73K Protease, and Arg-Gingipain
3097-v Glt-Gly-Arg-MCA 65147-16-2 u-PA (Urokinase)
3227-v Ac-Glu-Ser-Glu-Asn-MCA 896420-43-2 Vacuolar Processing Enzyme (VPE)
3115-v Boc-Glu(OBzl)-Gly-Arg-MCA 73554-94-6 -
3150-v Suc-Ile-Ile-Trp-MCA 133525-12-9 -
3099-v AMC 26093-31-2 Reference Compound

FRETを利用した消光性蛍光基質

蛍光団からの蛍光を消光団へのフェルスター共鳴エネルギー移動 (FRET) により低減させた消光性基質は、多種多様なものが報告されています。酵素により蛍光団を含むフラグメントと消光団を含むフラグメントとに分解されると、FRETは消失し蛍光団の蛍光が回復します [8]。また、二種類の蛍光団を導入し、FRETを利用した蛍光波長のズレを検出する基質も多数報告されています。

Nma-Phe-His-Lys(Dnp) [9]
FRETS-VWF73 [10]

【検出波長】

Nma – Dnp： ex. 340 nm / em. 440 nm
MOCAc (Mca) – Dnp： ex. 328 nm / em. 393 nm
Dabcyl – Edans： ex. 336-340 nm / em.472-490 nm　など

製品一覧

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メーカーコード 品名 CAS No. 標的酵素
3224-s FRETS-VWF73 - ADAMTS-13
3237-v Nma-His-Pro-Lys(Dnp) 1816946-37-8 Angiotensin I Converting Enzyme 2
3233-v Nma-Phe-His-Lys(Dnp) 1383372-75-5 Angiotensin I Converting Enzyme and Carboxypeptidase Y
3184-v MOCAc-Asp-Glu-Val-Asp-Ala-Pro-Lys(Dnp)-NH2 960145-75-9 Caspase-3
3200-v MOCAc-Gly-Lys-Pro-Ile-Leu-Phe-Phe-Arg-Leu-Lys(Dnp)-D-Arg-NH2 839730-93-7 Cathepsin D/E
3225-v MOCAc-Gly-Ser-Pro-Ala-Phe-Leu-Ala-Lys(Dnp)-D-Arg-NH2 592544-81-5 Cathepsin E
3231-v Abz-Glu-Pro-Phe-Trp-Glu-Asp-Gln-EDDnp 534615-70-8 Human Neutrophil Cathepsin G
3230-v Abz-Ala-Pro-Glu-Glu-Ile-Met-Arg-Arg-Gln-EDDnp 824405-61-0 Human Neutrophil Elastase
3232-v Abz-Val-Ala-Asp-Nva-Arg-Asp-Arg-Gln-EDDnp 1042405-14-0 Human Neutrophil Proteinase 3
3229-v Nma-Ile-His-Pro-Phe-His-Leu-Val-Ile-His-Thr-Lys(Dnp)-D-Arg-D-Arg-NH2 - Human Renin
3167-v MOCAc-Arg-Pro-Lys-Pro-Tyr-Ala-Nva-Trp-Met-Lys(Dnp)-NH2 158584-08-8 Matrix Metalloproteinase
3163-v MOCAc-Pro-Leu-Gly-Leu-A2pr(Dnp)-Ala-Arg-NH2 140430-53-1
3226-v MOCAc-Lys-Pro-Leu-Gly-Leu-A2pr(Dnp)-Ala-Arg-NH2 720710-69-0 Matrix Metalloproteinase-1/2/3/7/8/9/13/14/ Collagenase / Gelatinase / Matrilysin / Stromelysin / ADAM-17 / Tumor Necrosis Factor Converting Enzyme (TACE)
3168-v MOCAc-Arg-Pro-Lys-Pro-Val-Glu-Nva-Trp-Arg-Lys(Dnp)-NH2 158584-09-9 Matrix Metalloproteinase-3 (Stromelysin 1)
3216-v MOCAc-Ala-Pro-Ala-Lys-Phe-Phe-Arg-Leu-Lys(Dnp)-NH2 177337-81-4 Proteinase A / Pepsin
3249-v Dabcyl-Lys-Thr-Ser-Ala-Val-Leu-Gln-Ser-Gly-Phe-Arg-Lys-Met-Glu(Edans)-NH2 - SARS-CoV/SARS-CoV-2 Main Protease (Mpro)
3212-v MOCAc-Ser-Glu-Val-Asn-Leu-Asp-Ala-Glu-Phe-Arg-Lys(Dnp)-Arg-Arg-NH2 438625-61-7 β-Secretase
3217-v Nma-Gly-Gly-Val-Val-Ile-Ala-Thr-Val-Lys(Dnp)-D-Arg-D-Arg-D-Arg-NH2 600728-90-3 γ-Secretase
3164-s MOCAc-Pro-Leu-Gly 140430-56-4 Reference Compound for MOCAc-type Fluorescence-Quenching Substrate

参考文献

  1. 寺井琢也、長野哲雄 : 「第１章 有機蛍光プローブ」 菊地和也 編 『蛍光イメージング／MRIプローブの開発』 p.1, (シーエムシー出版) (2011).
  2. Erlanger, B.F., Kokowsky, N. and Cohen, W. : Arch Biochem Biophys., 95, 271 (1961).
  3. Persijn, J.P. and van der Slik, W. : J Clin Chem Clin Biochem., 14, 421 (1976).
  4. Orlowski, M. and Meister, A. : Biochim Biophys Acta., 73, 679 (1963).
  5. Zimmerman, M., Yurewicz, E. and Patel, G. : Anal Biochem., 70, 258 (1976).
  6. Smith, R.E., Bissell, E.R., Mitchell, A.R. and Pearson, K.W. : Thromb Res., 17, 393 (1980).
  7. Kanaoka,Y., Takahashi, T., Nakayama, H., Takada, K., Kimura, T. and Sakakibara, S. : Chem Pharm Bull (Tokyo)., 25, 362 (1977).（北海道大学とペプチド研究所との共同開発品）
  8. Latt, S.A., Auld, D.S. and Vallee, B.L. : Anal Biochem., 50, 56 (1972).
  9. Takahashi, S., Ono, H., Gotoh, T., Yoshizawa-Kumagaye, K. and Sugiyama, T. : Biomed Res., 32, 407 (2011).(秋田県総合食品研究センター、秋田大学とペプチド研究所の共同研究)
  10. Kokame, K., Nobe, Y., Kokubo, Y., Okayama, A. and Miyata, T. : Br J Haematol., 129, 93 (2005).(国立循環器病研究センターとペプチド研究所との共同開発品。「第7回産学官連携推進会議・産官学連携功労者表彰」の厚生労働大臣賞を受賞しました）

【本サイト掲載情報について】

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  • 掲載されている製品について
    【試薬】
    試験・研究の目的のみに使用されるものであり、「医薬品」、「食品」、「家庭用品」などとしては使用できません。
    試験研究用以外にご使用された場合、いかなる保証も致しかねます。試験研究用以外の用途や原料にご使用希望の場合、弊社営業部門にお問合せください。
    【医薬品原料】
    製造専用医薬品及び医薬品添加物などを医薬品等の製造原料として製造業者向けに販売しています。製造専用医薬品(製品名に製造専用の表示があるもの)のご購入には、確認書が必要です。
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  • 表示している希望納入価格は本記事掲載時点の価格です。
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