HuCAL®モノクローナル抗体作製サービス (抗体職人)
HuCAL®モノクローナル抗体作製サービス (抗体職人)
HuCAL® (Human Conbinatorial Antibody Library) はヒト抗体の多様性を網羅する独自の組換えFab抗体のライブラリーであり、さまざまな種類の抗原に対して特異性の高い人工抗体を作製するために開発された最高品質のライブラリーです。
独自の技術を利用したファージディスプレイ法により、戦略的な抗体選択法、そしてハイスループットなプロセスを実現します。
この迅速かつ柔軟で、高度に自動化されたプロセスにより、お客様のご要望に合わせた特殊な特異性を持つ抗体の選択や抗体フォーマットの調整が可能です。
特長
- HuCAL PLATINUM® Library
約450億ものパターンからなるHuCAL PLATINUM® は世界最大規模の高品質抗体ライブラリーです。このライブラリーは、大きな多様性を持つ相補性決定領域 (CDRs) 遺伝子とフレームワークマスター遺伝子の組を基礎とし、E.coliでの発現のために最適化されています。
- CysDisplay® Technology
CysDisplay® Technologyは最新の効率的なファージディスプレイの方法です。この技術では、開裂可能なジスルフィド結合をファージに導入することで、高親和性抗体の効率的な溶出を可能にしております。
- 成功報酬型サービス
ELISA陽性クローンが得られなかった場合は、抗体作製費用は発生いたしません。
※特殊な作業が発生する等、ご依頼内容によっては一部費用が発生いたします
サービスの流れ
抗原条件・作業概要
【抗原条件】
【作業概要】
| ①パニング | パニングは、抗体提示ファージライブラリから抗原に結合するファージを選択し、結合したファージは独自の技術 CysDisplay®を利用して回収され、このような抗原に対するセレクションを3ラウンド行います。 3ラウンドの内、お客様のご要望に応じてそれぞれのラウンドで異なる処理を行うことも可能です。 |
|
②スクリーニング |
パニングで絞り込まれたファージを、ご希望のFab抗体のフォーマットやタグに合わせて選択された発現ベクターへサブクローニングし、抗体遺伝子を大腸菌で発現させます。 そのライセートを用いて、抗原に対するELISAを行います。 抗体フォーマットの選定 ※ジーンフロンティア社のウェブページに移動します。 |
| ③シーケンシング | スクリーニングELISAにて陽性となったFab抗体クローンは、クローンに重複がある可能性があるため、ランダムに選択したクローンのシーケンシングを行い、クローンに重複がないようにします。 |
| ④候補抗体の調製 | スクリーニングELISAで納品基準を満たし、シーケンスがユニークなFabフォーマットの抗体が候補抗体となります。 通常は10クローンのシーケンシングを行い、そのうち5クローンを納品いたします。シーケンシングするクローンの数や納品する候補抗体の数を増やすことも可能です (別途費用が発生します)。 |
| ⑤最終抗体の調製 | ④候補抗体の中からお客様にお選び頂いた抗体が最終抗体となります。 最終抗体は1 mg 無料で納品いたします。オプションで最終抗体の数や生産量を増やすことも可能です。 また、抗体のフォーマットはFab断片一価もしくは二価から選択可能です。さらに、抗体に各種タグを付加したり、アルカリフォスファターゼ等との融合タンパク化することも可能です (一部オプションとなります）。 |
事例①抗イディオタイプ抗体の作製
近年、抗体医薬、とりわけ抗体薬物複合体ADC (Antibody-Drug Conjugates) の開発が加速しています。その開発の過程で求められるツールのひとつに、検出用の抗体があります。抗体職人は、その技術的な特性から、Payload特異的な抗体、抗原と結合した状態の抗体を認識する抗イディオタイプ抗体など、ユニークな特異性を持った抗体の作製が可能です。
ここでは、異なる３種類の結合モードおよび特性を有する抗イディオタイプ抗体作製についてご紹介します。
Type 1 (阻害抗体)
最もベーシックな抗イディオタイプ抗体です。阻害抗体であり、細胞ベースのアッセイやELISAにも最適です。
- 抗イディオタイプ抗体
- パラトープ特異的
- ターゲット抗体とその抗原の結合を抑制 (結合阻害性)
- 中和抗体
- 遊離のターゲット抗体の検出
Type 2 (非阻害抗体)
ターゲット抗体の抗原結合部位の外側のイディオトープに結合し、サンプル中の遊離抗体と結合抗体の両方を検出することができます。
- 抗イディオタイプ抗体
- パラトープ特異的ではない
- 結合阻害性はない
- ターゲット抗体の総薬物量の検出 (遊離、部分的に抗原と結合、完全に抗原と結合)
Type 3 (複合体特異的抗体)
遊離のターゲット抗体ではなく、抗原と結合したターゲット抗体を排他的に検出することができるユニークな特性を持った抗体です。
- ターゲット抗体とその抗原の複合体特異的抗体
- 結合阻害性はない
- 抗原と結合したターゲット抗体のみを排他的に検出
※ 抗イディオタイプ抗体とは
抗イディオタイプ抗体とは、抗原結合部位を含む抗体に固有の可変領域 (イディオタイプ: Idiotype) 内のエピトープ (イディオトープ: Idiotope) に結合する抗体のことです。イディオトープの組み合わせは各抗体に固有であるため、抗イディオタイプ抗体は、1つのモノクローナル抗体に特異的に結合するように作製することができます。
抗体医薬品の開発では、生体内でADA (抗薬物抗体: Anti-drug antibodies) が誘発されると、薬物の有効性が低下したり、副作用を引き起こしたりする可能性があるため、薬物分子の免疫原性を評価し、前臨床および臨床研究においてADA応答を効果的に評価できるアッセイ系が必要となります。
抗イディオタイプ抗体はADAと機能的に一致しており、ADAアッセイのポジティブコントロールとして使用することができます。また、抗イディオタイプ抗体はターゲット抗体のイディオトープを特異的に認識し、血中に含まれる多量の自然抗体と確実に識別することができるので、抗体医薬品の薬物動態 (PK) や薬力学 (PD) の試験にも広く活用することができます。
ADC(抗体薬物複合体)のペイロードに対する特異抗体取得実績もございます。
詳しくはご相談ください。
事例②酸化型DJ1ペプチドに特異的なHuCAL® 抗体の例
DJ1-C106（SO3）ペプチドではC106のシステイン残基が酸化されています。DJ1-C106 ペプチドは酸化されていない対照試料です。HCA024（AbD03055）はウェスタンブロッティングで酸化された抗原特異的に高い反応性を示しています。
その他事例 (ジーンフロンティア社ウェブページに移動します)
価格/納期
| サービス | 価格 | 納期 |
|---|---|---|
| HuCAL®モノクローナル抗体作製サービス | 1,800,000円 | 7週間～ |
HuCAL® 抗体およびその付随物は全てin vitroでの研究用途に限定してデザインおよび開発されています。お客様にはこの限定された用途のためにご提供させていただいております。これ以外の用途へのご使用を希望される場合はお問い合わせください。
| サービス | 費用 | 納期 |
|---|---|---|
| 抗体配列情報の開示 | お問い合わせください | |
| FabXpress Antibody Production Kit ※発現プラスミドをとハンドブックをキット化し納品 |
お問い合わせください | |
| FabからIgへのフォーマット変換 Human：IgG1,IgG2,IgG3,IgG4,IgG4Pro,IgA,IgE,IgM その他：マウス、ラット、ラビット等 |
お問い合わせください | |
- ご提供する抗体は、in vitroおよびin vivoでの研究目的にのみご使用できます。
- 診断薬、治験および商用目的でのご利用には、ライセンスが別途必要です。
- 医薬品用途ではご使用いただくことはできません。
お見積り・ご注文について
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- 掲載されている製品について
- 【試薬】
- 試験・研究の目的のみに使用されるものであり、「医薬品」、「食品」、「家庭用品」などとしては使用できません。
- 試験研究用以外にご使用された場合、いかなる保証も致しかねます。試験研究用以外の用途や原料にご使用希望の場合、弊社営業部門にお問合せください。
- 【医薬品原料】
- 製造専用医薬品及び医薬品添加物などを医薬品等の製造原料として製造業者向けに販売しています。製造専用医薬品(製品名に製造専用の表示があるもの)のご購入には、確認書が必要です。
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