オールインワンステップのmRNA IVT合成キット

TriLink社 CleanCap® AG (3' OMe) CleanScript™ IVT Kit

TriLink社の、高キャッピング効率かつ高タンパク質発現量のキャップアナログ CleanCap® 試薬がセットになったmRNA IVT合成キットです。 本キットは、100 μL合成スケールで25回分、20 μL合成スケールで125回分使用できます。1キットあたり20~25 mg(0.8~1mg/100 μL反応)の収量が期待できます。

特長

  • CleanCap® AG (3’OMe)が同梱
  • 95 %以上の高いキャッピング効率
  • 100 μL反応系で最大1 mgの高いmRNA収量
  • 改変型ポリメラーゼにより最大85 %のdsRNAを抑制

キット内容

キャッピング試薬

CleanCap® Reagent AG (3' OMe), 10 µmol

NTP 4種

Adenosine-5'-Triphosphate, 100 µmol
Cytidine-5'-Triphosphate, 100 µmol
Guanosine-5'-Triphosphate, 100 µmol
Uridine-5'-Triphosphate, 100 µmol

修飾NTP

N1-Methyl-Pseudouridine-5'-Triphosphate, 100 µmol

改変型 RNAポリメラーゼ

AG CleanScribe™ RNA Polymerase Mix, 250 µL

バッファー

10X AG CleanScript™ IVT Buffer, 1 mL

コントロールプラスミド

FLuc Control Plasmid, 25 µg

【別途必要な試薬】

■DNase/RNase free water
■DNA Template

データ例

dsRNAの形成を抑制し、キャッピングされたmRNAを高収量で合成

mRNA収量の向上

mRNA収量の向上

本キットのプロトコールでは、従来のプロトコールと比較してmRNAの収量が最大で2倍(10 mg/mL)増加した。

dsRNAの抑制

dsRNAの抑制

本キットに同梱の改変型RNAポリメラーゼを使⽤することで、 野生型T7 RNA ポリメラーゼ使用時と比較して、N1-Methyl-Pseudouridine修飾の有無にかかわらずdsRNA量が最⼤85 %減少した。

より高性能のmRNAを合成

本キットは、自然免疫の活性化を抑制して炎症反応を最小限にとどめ、タンパク質の発現量を向上させます。

改変型RNAポリメラーゼで合成したmRNA は、野生型T7 RNA ポリメラーゼで合成した場合と比較して、A549-Dual™ 細胞における免疫応答が低下した。

改変型RNAポリメラーゼで合成したmRNAは、野生型T7 RNAポリメラーゼで作製したmRNAと比較して、 A549細胞におけるタンパク質発現量が増加した。

CleanCap®TriLink Bio Technologiesの登録商標です。

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